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在液相色譜的流動(dòng)相里常加少量甲酸(或甲酸銨、甲酸鈉等緩沖鹽),主要為以下目的: 調(diào)節(jié)pH并形成弱酸環(huán)境,保持酸性化合物質(zhì)子化或壓制堿性溶質(zhì)的電荷變化,從而改善峰形、減少拖尾,提升重現(xiàn)性。甲酸揮發(fā)性好,不會(huì)像磷酸等造成殘留。 配合LC?MS檢測(cè):甲酸及其揮發(fā)性鹽容易在真空中去除,避免污染離子源;同時(shí)為分析物提供可控的質(zhì)子來源,提高正離子模式的響應(yīng)或穩(wěn)定化負(fù)離子模式的脫質(zhì)過程。 抑制金屬配位:微量金屬可能與某些化合物形成絡(luò)合導(dǎo)致尾峰,弱酸環(huán)境能降低這種影響。 用于反相HPLC中改善溶解性與抑制游離硅醇基,特別適合對(duì)酸性或弱堿性分子的常規(guī)分析;在LC?MS常選 0.1% 甲酸(體積比),有時(shí)與少量甲酸銨(1–10?mM)配合使用形成緩沖。 相比醋酸等,甲酸有較低的紫外吸收背景(220 nm以上較弱),對(duì)UV檢測(cè)干擾更??;而且高純甲酸便于制備批次一致的移動(dòng)相。 在方法開發(fā)時(shí)要注意:甲酸是弱酸,在強(qiáng)堿性分析物或需要更佳緩沖容量的場(chǎng)合可能不適用,可改用磷酸鹽緩沖等;選擇的甲酸濃度通常在0.05–0.5%之間,需結(jié)合目標(biāo)化合物pKa、檢測(cè)方式(特別是MS)和柱耐受的pH范圍優(yōu)化。 |
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